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本文標(biāo)題："冷凍管解凍及培養(yǎng)基回溫的溫度須配合細(xì)胞適合生長(zhǎng)的溫度"

活化培養(yǎng)的程序

打開(kāi)水浴槽，確認(rèn)溫度

將冷凍管以水浴快速解凍(1~2分鐘)，且
必須完全解凍(避免細(xì)胞內(nèi)冰晶反覆形成)

立 刻 將 解 凍 后 的 細(xì) 胞 液 加 至 flask(dish)
中，然后緩慢加入新鮮培養(yǎng)基(避免滲透
壓差傷害)

置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)，隔日再離心更換新鮮
培養(yǎng)基(避免剛解凍后的細(xì)胞受到離心之
物理傷害)

活化培養(yǎng)常見問(wèn)題

1. 冷凍管解凍不完全。

2. 未避免滲透壓差傷害。

3. 解凍完馬上離心。(解凍完后的細(xì)胞生長(zhǎng)勢(shì)弱，離心
使得細(xì)胞傷害更大，造成生長(zhǎng)勢(shì)無(wú)法回復。)

96.7.1~97.7.31期間 該類反應(yīng)占總反應(yīng)之35%

活化培養(yǎng)常見問(wèn)題

冷凍管解凍及培養(yǎng)基回溫的溫度須配合細(xì)胞適合生長(zhǎng)的溫度，
否則細(xì)胞容易生長(zhǎng)不佳。曾發(fā)生以下桉例:

1. SF9昆蟲(chóng)細(xì)胞適合生長(zhǎng)于低溫(28 ℃)環(huán)境，然而客戶(hù)解凍
該細(xì)胞時(shí)卻以37℃水溫解凍，結(jié)果日后生長(zhǎng)狀況不佳。
2. 客戶(hù)將細(xì)胞冷凍管置于56℃水浴下解凍。
3. 冷藏于4℃下之培養(yǎng)基未加以回溫即進(jìn)行培養(yǎng)。

培養(yǎng)基相關(guān)問(wèn)題

Q: 細(xì)胞培養(yǎng)資料單上建議于培養(yǎng)基中額外添加的Supplement
是否可以乎略？

例如培養(yǎng)基中已含有L-Glutamine(L-Gln)，是否還要添
加？
1. L-Gln 濃度是否到達(dá)建議量。
2. 培養(yǎng)基中的L-Gln 容易分解，因此放置過(guò)久的培養(yǎng)基
必須再補(bǔ)充至足量的L-Gln。
3. 細(xì)胞是否容易受到L-Gln不足而受影響。Raw264.7細(xì)胞
容易因L-Gln 不足而分化。