--- --- ---
(點擊查看產(chǎn)品報價)

本文標(biāo)題："GUS分析測量每個時間點其405奈米的吸光值"

GUS Assay
1. 于冰上解凍細(xì)胞溶解物
2. 新鮮製備GUS分析緩沖液并預(yù)溫至37°C
3. 準(zhǔn)備可棄式比色管 (至少每個測試三管) ，每管加入800微升 0.4M碳酸鈉 (反應(yīng)終止溶液)
4. 每個樣本準(zhǔn)備一2ml含800微升如上述之GUS分析緩沖液的微量離心管。加入200微升細(xì)胞溶解物 (這使得PNPG終濃度為1mM) 記錄時間
5. 將反應(yīng)置于37°C并記錄時間 (注: 使用恆溫水槽是較好的，但一致性是要點) 。注意黃色的產(chǎn)生 (p-nitrophenol)。于不少于三個時間點 (如15、30、45分)
 由每個樣本取出100微升置于比色管 (當(dāng)分析粗製的細(xì)胞溶解溷合液時，將反應(yīng)試管離心取100微升上清液置于比色管) 。將反應(yīng)試管短暫的漩渦式震盪后，
迅速至回37°C。時間點無須等間隔，但一定要記錄時間。
6. 測量每個時間點其405奈米的吸光值對比于終止之空白反應(yīng) (注: 形成的顏色于終止溶液中是穩(wěn)定的；
如果你同時測量所有時間點的反應(yīng)而非再每個時間點測量時，會有少許誤差)