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顯微熒光分光光度計的用途,有哪些優(yōu)點
顯微熒光分光光度計是一種在一定波長范圍內(nèi)測定
熒光顯微物體所發(fā)射的熒光量的儀器,
實質(zhì)上它是分光光度計與
熒光顯微鏡的結(jié)合。它通過
測量某些生物學結(jié)構(例如膠原纖維、葉綠體等)的自發(fā)熒光
或用熒光染料染色的某些生物學物質(zhì)的繼發(fā)熒光,
從而對生物學標木進行定量分析。顯微熒光分光光度計
與顯微分光光度計的差別僅僅是所使用的
顯微鏡不同而己,
同以光的吸收為基礎的顯微分光光度術相比較,顯微熒光
光度術具有一些明顯的優(yōu)點。
首先,當背景足夠暗時,這個方法對于非常少量的熒光物質(zhì)是高度靈敏的,
一般熒光法所用染料的最低濃度比其他吸收法低1萬倍。
第二,由于熒光物質(zhì)木身就是自發(fā)光物體,不管測闌內(nèi)物體的形狀是規(guī)則
的還是不規(guī)則的,不節(jié)物質(zhì)分布是均勻的還是不均勻的,
由物體所輻射的光量子將在光電倍增管上產(chǎn)生相同的效應
因此對于顯微熒光光度術來說就避免了分布誤差。
第三,使用這種方法操作比較簡便,測量迅速,特別適合于大量樣品的分析。
因此,顯微熒光分光光度計己經(jīng)應用于蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)的細胞化學
和組織化學、熒光抗體技術和酶標技術等廣泛的領域。同時,掃描技術也已被
用于顯微熒光分光光度計中。
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