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本文標(biāo)題："激光共焦熒光顯微鏡測(cè)試-熒光技術(shù)的應(yīng)用"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-6-27 17:23:41 本站主頁(yè)地址：http://m.mhzljd.cn
激光共焦熒光顯微鏡測(cè)試-熒光技術(shù)的應(yīng)用
熒光漂白
光漂白(也稱為褪色)是在光照條件下使其發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或結(jié)構(gòu)改變
，從而失去發(fā)熒光的特性，就是所謂的漂白。它常用于生物體內(nèi)擴(kuò)散速
率常數(shù)的測(cè)定。由單重激發(fā)態(tài)躍遷到三重激發(fā)態(tài)，熒光團(tuán)會(huì)和另外的分
子反應(yīng)產(chǎn)生不可逆的共價(jià)修正。簡(jiǎn)而言之，熒光漂白是熒光團(tuán)的光化學(xué)
破壞。在熒光漂白之前，某一特定熒光團(tuán)的激發(fā)和輻射周期的平均數(shù)值
取決于分子結(jié)構(gòu)及所處環(huán)境。一些熒光團(tuán)漂白很快，只需釋放一些光子
，然而對(duì)于其他的，在漂白之前需要經(jīng)歷成千上萬(wàn)次周期。
每一個(gè)熒光團(tuán)都有不同的光漂白特性。對(duì)于激光共焦熒光顯微鏡來(lái)
講，光漂白是最大的問(wèn)題，因此實(shí)際測(cè)試中需要考慮避免或減輕光漂白
程度。因此在激光共焦熒光顯微鏡測(cè)試中，需要選取合適的染料，該染
料可以在正常激光強(qiáng)度照射下最大程度減輕光漂白程度。當(dāng)具有光漂白
的染料用于測(cè)試中，以下三種方法可以降低光漂白程度：盡可能用低的
激光強(qiáng)度；盡可能降低照射的時(shí)間(實(shí)際測(cè)試中，盡快完成一次測(cè)試)；
采用自由基清除體。
多數(shù)的光漂白可以歸結(jié)于自由基。采用自由基清除體則能降低光漂
白的速率。常用自由基清除體包括五倍子酸丙烷、對(duì)苯二胺以及三乙烯
二胺(DABCO)。
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