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酵母培養(yǎng)物-酵母、酵母菌分析圖像
顯微鏡
以甲基營(yíng)養(yǎng)型酵母、畢赤酵母菌(Pichia pastoriS)和多形漢
遜酵母(Hansenula poly—morpha)作為宿主來(lái)生產(chǎn)蛋白質(zhì)是非常具
有吸引力的。這些酵母能夠以甲醇作為碳源和能源進(jìn)行生長(zhǎng)。甲醇
也是AOX 1啟動(dòng)子的誘導(dǎo)物,該啟動(dòng)子通常被用于控制目標(biāo)蛋白的
表達(dá)。這些酵母也能達(dá)到非常高的細(xì)胞濃度(例如高至1009/L)。
對(duì)于一些具有高表達(dá)水平的蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō),由于細(xì)胞濃度可以達(dá)到很
高,這些酵母培養(yǎng)物的體積生產(chǎn)率要比大腸桿菌高。這些宿主的蛋
白質(zhì)折疊和分泌通常也優(yōu)于大腸桿菌。這些酵母能夠進(jìn)行簡(jiǎn)單的糖
基化修飾,與釀酒酵母相比,過(guò)度糖基化的程度要小一些。像許多
其他宿主系統(tǒng)一樣,它們的效果通常和目標(biāo)蛋白有密切的關(guān)系。甲
基營(yíng)養(yǎng)型酵母的缺點(diǎn)是由于高的細(xì)胞濃度和代謝速度,會(huì)產(chǎn)生大量
的必須被移走的代謝熱,另外還需要大量的氧氣。由于甲醇既是生
長(zhǎng)底物又是誘導(dǎo)物,在維持細(xì)胞活力的同時(shí)對(duì)蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行有效
誘導(dǎo),這需要非常好的過(guò)程控制。此外,高濃度的甲醇具有抑制作
用(即底物抑制),這也需要很好的過(guò)程控制(以精確控制甲醇濃度)
。大反應(yīng)器的生產(chǎn)放大通常是非常具有挑戰(zhàn)性的,這是因?yàn)樵诰哂?/div>
較長(zhǎng)的混合時(shí)間的大反應(yīng)器中進(jìn)行熱量移除、供氧和過(guò)程控制通常
要困難得多。甲醇也是易燃的,處理大量的甲醇涉及安全問(wèn)題。雖
然如此,這些甲基營(yíng)養(yǎng)型酵母正變得日益重要。
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