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本文標題："表面的粗糙度，黏附性等物理特征分析圖像顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2016-12-26 0:56:23 本站主頁地址：http://m.mhzljd.cn
表面的粗糙度，黏附性等物理特征分析圖像顯微鏡
基本操作
細菌是海洋中微型生物的主要組成者之一。以下操作介紹以細
菌樣品為例，工作模式以液體環(huán)境下的輕敲模式為例。
樣品準備
對于純培養(yǎng)的菌株，指數(shù)后期取樣時菌液的濃度大約是是108
cells／mI。，取1毫升菌液．用蒸餾水懸�。�2000～3000 rpm的
轉(zhuǎn)速離心洗去碎屑和鹽分，未經(jīng)充分洗凈的胞外多糖對成像也有較
大的影響。
細菌在液體池中容易漂浮，難以和基底牢固結(jié)合。因此目前固
定通過電荷吸附的方
顯微鏡觀察
樣品制備好之后，將固定有樣品的鐵片置于AFM的載物臺上，
可以選用100／微米-100微米掃描管，用接觸模式的Si3N4探針進行
成像，將探針和液體池裝好，逐步將探針逼近表面，當針尖和樣品
比較接近時，調(diào)節(jié)激光光斑的位置，使光斑位于四相光電檢測器中
心。之后切換到輕敲模式，調(diào)好針尖的震動頻率，選擇下針。整個
成像過程中盡量保持室溫恒定，避免來自外界的震動源干擾。起始
的掃描范圍是10肚m，頻率1 Hz。首先在大范圍10μm進行大范圍掃
描以便選取合適的區(qū)域，然后通過軟件操控，縮小掃描范圍，同時
調(diào)節(jié)掃描頻率，比例增益，積分增益，電壓值等各項參數(shù)以獲得清
晰的成像，觀察細菌表面的細微結(jié)構(gòu)。
在用輕敲模式掃描過程中，在時間因素影響不大的情況下，盡
量小的掃描速率可以減少針尖對樣品的傷害，使針尖在反饋系統(tǒng)的
控制下更好的掃描樣品表面，獲得更真實的采樣點信息。在掃描的
過程中，圖像從四個不同的掃描角度分別掃描多次，以避免掃描過
程中的假象，每個區(qū)域都通過掃描獲得三至四幅高質(zhì)量的圖像，并
從中選取具有代表性的一張。
圖像分析
掃描獲得的圖像可以進行三維變換處理，獲得更直觀的三維形
貌，并通過后臺軟件對樣品表面的粗糙度，黏附性等物理性質(zhì)進行
分析
原子力顯微鏡技術(shù)的特點與優(yōu)勢
在海洋中不同的溫、鹽、壓力、酸堿條件和光強等環(huán)境因子的
相互作用促成了海洋超微型生物的形態(tài)和表面結(jié)構(gòu)的多樣性。在對
復(fù)雜多變的自然環(huán)境的適應(yīng)過程中，超微型生物形態(tài)的多樣性反應(yīng)
了其對環(huán)境的特殊響應(yīng)和潛在生理變化過程，具有重要的研究意義
。然而，在對超微型生物的研究發(fā)展過程，如何盡量真實的反映研
究對象的生活狀態(tài)，最大限度的減小人為因素的干擾是科研人員一
直追求的目標。
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