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微量加樣器吸取250微米混勻細(xì)胞懸液實(shí)驗(yàn)
顯微鏡
用微量加樣器吸取250微米混勻的細(xì)胞懸液,轉(zhuǎn)入袖珍管。用一個(gè)
干凈的加樣器尖吸取等體積臺(tái)盼藍(lán)溶液加入細(xì)胞懸液中。用拇指和食指
快速輕彈袖珍管幾次使之混勻。立即用一個(gè)巴斯德吸管尖吸取一滴細(xì)胞
懸液,輕輕地將其滴在臨近計(jì)數(shù)區(qū)的蓋玻片邊緣上。毛細(xì)作用使細(xì)胞懸
液移到蓋玻片下面,填滿中央和邊緣溝之間的區(qū)域。在蓋玻片的另一邊
重復(fù)該操作(注:如果蓋玻片沒(méi)有正確放置,計(jì)數(shù)器和計(jì)數(shù)器任何一邊
的小溝里將溢滿細(xì)胞懸液,無(wú)法獲得準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù))。
e.將計(jì)數(shù)器放于顯微鏡載物臺(tái)上,移動(dòng)載物臺(tái)直到將三條平行線
界定的25個(gè)小方格的網(wǎng)格位于中央為止。計(jì)25個(gè)小方格內(nèi)的總細(xì)胞數(shù)(
染色和未染色的)(它們每一個(gè)又再分為16個(gè)更小的方格便于計(jì)數(shù))。為
了避免將同一個(gè)細(xì)胞重復(fù)計(jì)數(shù),只數(shù)三線隔開(kāi)的壓上線、左手線和中央
區(qū)的細(xì)胞。如果細(xì)胞數(shù)大可用一個(gè)計(jì)數(shù)器(注1:計(jì)數(shù)面積取決于細(xì)胞密
度。如果中央的方格細(xì)胞數(shù)達(dá)到100,這個(gè)對(duì)于精確度而言足夠了。如
果細(xì)胞密度較低,計(jì)數(shù)四個(gè)角的總細(xì)胞數(shù),并取平均值。為了更精確建
議重復(fù)細(xì)胞計(jì)數(shù),并取兩次讀數(shù)平均值。注2:如果用倒置相差顯微鏡
,不染色即可區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。活細(xì)胞明亮可折射出清楚的輪廓;
死細(xì)胞扁平,呈灰色,邊緣不光滑)。
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