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本文標(biāo)題："濃度的凝膠相比樣品對(duì)比分析圖像顯微鏡"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2017-3-12 3:02:04 本站主頁(yè)地址：http://m.mhzljd.cn
濃度的凝膠相比樣品對(duì)比分析圖像顯微鏡
在梯度凝膠中分離蛋白質(zhì)
與均一濃度的凝膠相比，聚丙烯酰胺濃度呈梯度增加的凝膠能
分辨的蛋白質(zhì)分子質(zhì)量范圍更寬，特別是小分子質(zhì)量范圍的蛋白質(zhì)
條帶更為清楚。與均一凝膠不同，梯度凝膠分離蛋白質(zhì)更容易描繪
出分子質(zhì)量為10～200kDa的線性曲線，這更有利于計(jì)算蛋白質(zhì)的分
子質(zhì)量。
硫酸銨，丙烯酰胺重溶液應(yīng)一直保持冰浴，以防在使用時(shí)因加入
了過(guò)硫酸銨而發(fā)生
聚合。在梯度膠混合器的輸出閥和兩液槽之間的連通閥處于關(guān)閉
狀態(tài)時(shí)，制作一塊
0．75 mm厚的凝膠，在儲(chǔ)液室加入7 m1丙烯酰胺凝膠輕(低濃度)
溶液。3．稍稍打開(kāi)連通閥，讓少量(約200“1)輕溶液通過(guò)閥門(mén)流
入混合室。在混合室中加
入7 ml丙烯酰胺凝膠重(高濃度)溶液。向兩液室的丙烯酰胺溶液
中加入特定量的
過(guò)硫酸銨，且每7 ml溶液加入約2．3“l(fā) TEMED，并以一次性吸
管加以混勻。4．完全打開(kāi)連通閥。打開(kāi)磁力攪拌器，調(diào)整速率使
混合室中液體稍起漩渦即可。5．慢慢調(diào)節(jié)輸出閥，調(diào)流速至2 ml
／min。6．從夾層的頂部加入凝膠液體，將吸頭對(duì)著夾層的一面使
液體緊沿一片玻璃平板而下，
重的液體先流入夾層，接著是逐漸越來(lái)越輕的液體。待輕溶液全
部流人輸出管時(shí)，
要加倍注意，并調(diào)整流速以保證最后的少量液體不會(huì)很快地流入
夾層以致擾亂梯度。7．在梯度膠的頂部加入水飽和異丁醇，讓凝
膠聚合1h。
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