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本文標(biāo)題："纖溶性微生物分解纖維素的過(guò)程緩慢且不完全"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2017-8-30 3:08:43 本站主頁(yè)地址：http://m.mhzljd.cn
纖溶性微生物分解纖維素的過(guò)程緩慢且不完全
纖溶性微生物分解纖維素的過(guò)程緩慢且不完全，因此有必要通
過(guò)基因工程手段來(lái)制造一種具有更有效的纖維素酶活性的微生物：
為此．從原核生物和真核生物中分離出編碼纖維素酶活性中具有不
同酶功能的基因。
通過(guò)下列簡(jiǎn)單而有效的技術(shù)可以克隆原核生物內(nèi)切葡聚糖酶基
因。
①在大腸桿菌中構(gòu)建纖溶性原核生物的DNA基因庫(kù)，宿主菌在
加有選擇抗生素固體培養(yǎng)基上過(guò)夜培養(yǎng)。
②菌落在含有羧甲基纖維素(CMC．一種可溶的纖維素衍生物)
的瓊脂上生長(zhǎng)。平板37℃培養(yǎng)幾個(gè)小時(shí)內(nèi)，在合成和分泌內(nèi)切葡聚
糖酶菌落近處的羧甲基纖維素分子將被部分消化。合成非分泌型內(nèi)
切葡聚糖的轉(zhuǎn)化子不能分解底物，這是因?yàn)檫@些底物體積太大，不
能進(jìn)入細(xì)胞。
③消化的CMC區(qū)域先用對(duì)細(xì)菌無(wú)毒的剛果紅染料浸泡，冉用NaC
l沖洗。剛果紅選擇性吸附于高分子量的纖維素鏈中，顯示出紅色
；相對(duì)而言．它時(shí)小分子量的多糖黏附性差而顯黃色。NaCl處理使
染料的結(jié)合更加穩(wěn)定，如果細(xì)菌菌落產(chǎn)生一種分泌型的內(nèi)切葡聚糖
酶，它的周?chē)鷷?huì)產(chǎn)生一個(gè)黃暈環(huán)；沒(méi)有被降解的CMC作為背景．呈
紅色
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