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本文標題："外熒光顯微鏡計數(shù)被著色的細胞分析顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2018-9-17 23:11:51 本站主頁地址：http://m.mhzljd.cn
直接外熒光過濾器技術
這種膜過濾技術被認為是基本方法的改良。直接外熒光過濾器技術(di
rect epifluorescent filtertechnique，DEFT)將熒光染色和熒光顯微技
術結合，是一種快速的食品微生物檢測技術和方法。稀釋的食品樣品液通
過5 p．m的尼龍過濾膜進行過濾，收集過濾液并用2 mI。去利通(Triton；
譯者注：非離子型表面活性劑的商品名)X一100和0．5 mL胰島素進行處理
。這種試劑用來溶解肉體細胞和防止阻塞過濾器。培養(yǎng)之后，過濾液通過0
．6肛m孔徑的聚碳酸酯過濾膜過濾，隨后濾膜被11'f啶橙著色、干燥后，
使用外熒光顯微鏡計數(shù)被著色的細胞，顯微鏡下每個區(qū)域細胞的平均數(shù)相
加即得每克樣品的細胞數(shù)。20～30 min得到結果，應用此方法測得肉和乳
制品中的微生物數(shù)量約為6 000 cfu／g。
直接外熒光過濾技術應用于乳品中凹…，與APC法和DMC法所獲得的結
果類似，在5×103～5×108 cfu／mI。。在大約10 min內(nèi)，這種方法能夠
檢出乳品種活性革蘭氏陰性菌和全部的革蘭氏陽性菌no…。大約20 min內(nèi)
，可以計數(shù)熱處理乳及乳制品中的微生物，檢測下限細菌數(shù)少到5 700 cfu
／mI。[9 8。。通過6個實驗室協(xié)作研究，對比了DEFT(直接外熒光過濾器
法)和APC(好氧平板計數(shù)法)，通常情況下兩者的相關系數(shù)在0．9以上。但
是DEFT(直接外熒光過濾器法)的重復性要比APC(好氧平板計數(shù)法)的重復性
差1．5倍，而實驗的再現(xiàn)性卻僅是APC(好氧平板計數(shù)法)的3倍[9“。DEFT(
直接外熒光過濾器)法可以計數(shù)過濾后的固體食品
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