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小腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)
使用的細(xì)胞株為小腸上皮細(xì)胞 (intestinal epithelial cells, cell line No. 6, IEC-6),將細(xì)胞之冷凍管由液態(tài)氮筒中取出,置于37℃水浴中快速解凍約一分鐘,而后在無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)以無(wú)菌吸管將細(xì)胞懸浮液取出,以Dulbecco’s modified Eagle medium (DMEM)含有penicillin (100 units/ml)、streptomycin (100 μg/ml)、amphotericin B (250 ng/ml)及5 % fetal bovine serum (FBS)的培養(yǎng)液培養(yǎng),再置于37℃、空氣中含有5 % CO2之培養(yǎng)箱中,并每隔72小時(shí)更換新的培養(yǎng)液,待小腸上皮細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿(約3 ~ 5天),將培養(yǎng)液移除后加入5 ml HBSS (Hanks’ Balanced Salt Solution without Ca2+ and Mg2+)清洗,
再以0.25 % trypsin- 0.02 % EDTA分離細(xì)胞并進(jìn)行繼代培養(yǎng)(subculture)
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