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本文標(biāo)題："用于酵母孢子和細(xì)菌細(xì)胞等小型細(xì)胞的顯微鏡型號(hào)"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2014-4-30 14:34:16 本站主頁地址：http://m.mhzljd.cn
用于酵母孢子和細(xì)菌細(xì)胞等小型細(xì)胞的顯微鏡型號(hào)
人們常用顯微操作器來分離包括酵母在內(nèi)的微生物的單細(xì)胞和
單孢子.對(duì)于酵母孢子和細(xì)菌細(xì)胞等小型細(xì)胞，可以用與子囊解剖
相同的解剖針來分離.但是，對(duì)于酵母的二倍體或多倍體等大型細(xì)
胞，即便用解剖針觸著細(xì)胞并使之移動(dòng)，也很難使之附著在解剖針
上。這時(shí)，一般采用微型移液管。
一、微型移液管的制作方法
將外徑約0.8mm的細(xì)玻璃管的一端拉細(xì)，插入金屬鞘固定，將
玻璃管垂直，具體步驟全部操作都在顯微鏡下面進(jìn)行。
細(xì)胞分離操作
操作前制備好移液管，不必再滅菌.首先，取下起保護(hù)作用的
金屬鞘，裝在用于顯微操作的支管或L型移液管夾具上.
在這種情況下，用樹脂固定插入移液管的夾具口，同時(shí)密封.在三
通口處.將其一口用橡皮管連接，橡皮管的另一端接一個(gè)約5m1的
注射器，將它做為接收器，把移液管孔向上，橡皮管用接收器臺(tái)夾
固定.
分離技術(shù)與子囊解剖相同.也在瓊脂板上進(jìn)行.把瓊脂板從培
養(yǎng)皿中無菌地取出，放在大型玻璃上(最好為24 X 35mm 或 24X50
mm).用接種環(huán)沽取細(xì)胞懸液點(diǎn)滴在瓊脂表面上，置于解剖濕室
內(nèi)放置一會(huì)兒，使水分滲入瓊脂內(nèi).這時(shí)如果留有大量的水份，
則很難使微型移液管接近目的細(xì)胞。似過于干燥也不好.最好是使微
型移液管頂端接觸細(xì)胞時(shí).處于可滑動(dòng)狀態(tài)。使移液管慢慢接近于
這種狀態(tài)下的瓊脂板上的細(xì)胞，這時(shí)用左手拿注射器，加壓，加大
移液管內(nèi)的氣壓，壓力過高，則會(huì)吹起泡來;而壓力過低，則由于
毛細(xì)管現(xiàn)象而吸收大量的細(xì)胞.所以.接觸到了細(xì)胞時(shí)，要稍稍降
低移液管內(nèi)壓，使細(xì)胞滑進(jìn)移液管中.由于吸進(jìn)去的細(xì)胞僅僅留在
移液管的頂端部分.因此，需將移液管頂端下移.離開瓊脂表面，
然后，移動(dòng)瓊脂板至適當(dāng)?shù)奈恢?使移液管上升，與瓊脂表面接
觸，同時(shí)提高移液管內(nèi)壓.細(xì)咆就由移液管口滑出、跑到瓊脂板
上.重復(fù)操作.在一個(gè)瓊脂板上可以分離到10-20個(gè)單細(xì)胞，分離
操作終了 ，將瓊脂板從玻璃上取下.轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中的背養(yǎng)培養(yǎng)基
平板上，在適當(dāng)?shù)臏囟认路乐?-3天，等待菌落長出為止
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