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不同的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分級(jí)分離實(shí)驗(yàn)型
生物顯微鏡
細(xì)胞分級(jí)分離實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
細(xì)胞分級(jí)分離必須進(jìn)行兩個(gè)連續(xù)的步驟,即勻漿和分離。
勻漿基本上是一個(gè)解體階段,把組織變成所謂勻漿。第二階
段是分離,通過(guò)使具有某些共同物理特性(例如大小和密度)
的勻漿成分分組集中,在系統(tǒng)中重新引入一個(gè)新的序列。
理想的分離方法是要得到象細(xì)胞內(nèi)所存在的那樣的細(xì)胞
內(nèi)成分,也就是說(shuō)要不改變其形態(tài)學(xué)和代謝狀態(tài),并且產(chǎn)品是
定量的。大部分細(xì)胞分離技術(shù)不能滿足這些要求,而要有一
定程度的折衷,例如保留其形態(tài)學(xué)的分級(jí)分離方法可能會(huì)破
壞其活性,而保留其活性的方法往往會(huì)使其失去形態(tài)學(xué)的結(jié)
構(gòu)。
不同的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和目的常常需要選擇不同的組織。從不
同種動(dòng)物得到的組織和細(xì)胞可能有不同的成分、脆性和密度,
這種區(qū)別可能有助于一種特殊的分離技術(shù)。例如,肝臟對(duì)于
研究線粒體的功能是一個(gè)理想的組織,因?yàn)楦渭?xì)胞含有大量
的線粒體,而胸腺組織經(jīng)常用于核的分離,因?yàn)樾叵偌?xì)胞的核
占細(xì)胞質(zhì)團(tuán)的將近50形。但是,總的說(shuō)來(lái),就細(xì)胞的形狀和
大小來(lái)說(shuō)組織是不均一的,從動(dòng)物組織勻漿分離得到的亞細(xì)
胞部分總是反映了這種不均一性。因此,對(duì)分離部分的化學(xué)
分析只能得到對(duì)這部分成分的一個(gè)總的描述。動(dòng)物器官的血
管和結(jié)締組織的含量也有不同。一般說(shuō),一個(gè)器官的結(jié)締組
織越多,組織勻漿的問(wèn)題就越大,因此,得到的亞細(xì)胞成分的
產(chǎn)率越小。
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