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本文標(biāo)題："藍(lán)色熒光的細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)-熒光分析顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-12-28 21:45:57 本站主頁地址：http://m.mhzljd.cn
藍(lán)色熒光的細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)-熒光分析顯微鏡
細(xì)胞活性檢測(cè)技術(shù)
核酸染色技術(shù)
健康微型生物細(xì)胞的DNA集中在被稱為類核體的區(qū)域。用核酸
染料如DAPI處理后，在熒光顯微鏡下即可看到類核體。然而DAPI染
色會(huì)產(chǎn)生非專一性的結(jié)果——和蛋白顆�；蚣�(xì)胞殘?bào)w結(jié)合，所以經(jīng)
典的DAPI染色得到的結(jié)果普遍認(rèn)為偏高。
實(shí)驗(yàn)室里維持在饑餓狀態(tài)、沒有類核體的細(xì)菌在被提供營養(yǎng)
物質(zhì)后，重新獲得了黃色熒光的類核體，相應(yīng)地，自然樣品在添加
營養(yǎng)后，近20％沒有類核體的細(xì)菌又出現(xiàn)了類核體。這些結(jié)果顯示
，沒有類核體的細(xì)胞可能仍活著，但所含的DNA可能處于一種相對(duì)
松散的狀態(tài)或其濃度不夠以致于標(biāo)準(zhǔn)的DAPI染色無法出現(xiàn)陽性結(jié)果
。
該技術(shù)的核心足除掉DAPI非專一性的染色，尤其是在鹽度高于
12 ppt時(shí)，DAPI最有可能與細(xì)菌表面結(jié)合，而不是穿過細(xì)胞膜和DN
A結(jié)合(Zweifel&Hagstrom，1995)。將非專一性結(jié)合的DAPI去除，
是利用2一丙醇(2一propan01)對(duì)DAPI染色的細(xì)菌進(jìn)行洗滌。在去染
色前一定要進(jìn)行固定，因?yàn)檫@能使細(xì)胞膜變得具有剛性，更易于染
色劑的進(jìn)入。在模糊的藍(lán)色熒光的細(xì)胞里，帶有類核體的細(xì)胞看起
來呈亮的黃點(diǎn)。
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