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本文標(biāo)題："固相載體上特異同工酶分子數(shù)等于帶有標(biāo)記"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-10-3 13:44:32 本站主頁(yè)地址：http://m.mhzljd.cn
固相載體上特異同工酶分子數(shù)等于帶有標(biāo)記
酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA)
又稱酶標(biāo)免疫吸附法(enzyme．1aballed immunosorbent assay，EUSA
)，屬酶免疫法(enzyme immunologic assay，En)的一種，又可分為直
接法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法和非競(jìng)爭(zhēng)法，其中以非競(jìng)爭(zhēng)性的夾心ELISA法較
為常用而靈敏，此法是將特異的同工酶抗體吸附在固相載體(常用聚苯
乙烯微孔反應(yīng)板或珠子)上，加入樣品后抗體與特異的同工酶結(jié)合，清
洗掉其他型別的同工酶，再用帶有標(biāo)記酶的相應(yīng)抗體與固相載體上所結(jié)
合的同工酶結(jié)合，即固相載體上結(jié)合的特異同工酶分子數(shù)等于帶有標(biāo)記
酶的抗體分子數(shù)，也就等于標(biāo)記酶的分子數(shù)，標(biāo)記酶的活性強(qiáng)弱可間接
反映所結(jié)合的同工酶多少，測(cè)定標(biāo)記酶的活性即代表所結(jié)合的同工酶活
性。由于所測(cè)的同工酶既與固相載體上的抗體結(jié)合，又與帶有標(biāo)記酶的
抗體結(jié)合，夾在2種抗體之間，故稱為“夾心”酶聯(lián)免疫吸附法。
夾心ELISA尤其適用于測(cè)定有雜化亞基的同工酶。例如，測(cè)定CK-MB
時(shí)，先將抗M亞基的抗體固定聚苯乙烯微孔板上使抗體固相化，加入待
測(cè)樣品后，樣品中的CK-BB因不能與固相上的CK-M抗體結(jié)合而被洗去，
而CK-MB及MM被結(jié)合于固相上。經(jīng)一定時(shí)間后再加人用酶(常用辣根過(guò)氧
化物酶或小腸腳)標(biāo)記的抗CK-B亞基的抗體，此酶標(biāo)抗體只能和固相上
的CK—MB結(jié)合，而不能與CK-MM結(jié)合。最后測(cè)定固相上的標(biāo)記酶(√岫)
的活性，即可以標(biāo)準(zhǔn)曲線求知CK．MB的濃度。樣品中的CK-MB愈多，結(jié)
合酶標(biāo)的CK-B抗體愈多，固相上標(biāo)記酶的活性也愈高。
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