未來(lái)植物病毒檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展
自 1980 年代起, ELISA 技術(shù)即為種苗業(yè)界接受度最高、應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)方法,使得相關(guān)耗材、儀器及藥品產(chǎn)業(yè)一直蓬勃發(fā)展;由于 ELISA 技術(shù)之關(guān)鍵在于病毒檢測(cè)用抗體的品質(zhì),因此也帶動(dòng)了各國(guó)植物病毒檢測(cè)抗體及試劑相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。惟 ELISA 適用于大量樣品的檢測(cè),為配合種苗培育現(xiàn)場(chǎng)少量樣品快速檢測(cè)的需求,近年來(lái)亦有廠商開(kāi)發(fā)「免疫試紙條」,此類檢測(cè)套組具有可于常溫運(yùn)送、操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),且敏感度亦不差;然此類檢測(cè)套組僅可供現(xiàn)場(chǎng)人員參考,不適用于健康種苗繁殖前之親本病毒檢測(cè)。
而核酸檢測(cè)自 90 年代初,即有許多研究如雨后春筍般發(fā)展,早期以應(yīng)用互補(bǔ)序列之核酸探針技術(shù)為主,此方法雖然較血清免疫技術(shù)敏感,但因使用放射線物質(zhì)而有安全與環(huán)保顧慮,后來(lái)改以非放射物質(zhì)標(biāo)定。 PCR 技術(shù)自發(fā)明以來(lái),不但提昇了植物病毒檢測(cè)敏感度,有效減少病毒漏檢的風(fēng)險(xiǎn),亦使檢測(cè)技術(shù)多元化,因而相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展較 ELISA 更為快速;雖然 PCR 技術(shù)成本仍較偏高,且無(wú)法進(jìn)行大量樣品的病毒檢測(cè),不過(guò),因其敏感度高,除了可考慮用于重要種源或組織培養(yǎng)之親本的病毒篩檢,未來(lái)朝可于單一反應(yīng)檢測(cè) 2 種以上病毒的多目標(biāo)型 RT-PCR ( multiplex RT-PCR )技術(shù)方向研發(fā),以節(jié)省成本